Бактериоскопические исследования

Интерпретация результатов бактериоскопии

Прямая микроскопия нативного материала является частью клинического исследования пациента, цель которого – определить морфологию микроорганизмов и наличие воспалительной реакции со стороны организма.

Показания: Прямая микроскопия нативного материала дает информацию о общем состоянии генитального тракта, позволяет оценить наличие и интенсивность воспалительной реакции, зрительно оценить клетки слизистой оболочки и имеющиеся микробы. При известных инфекциях прямая микроскопия имеет диагностическую ценность (гонорея у мужчин, трихомоноз).

Исследуемый материал: Соскоб из цервикального канала, влагалища, уретры (на предметное стекло)

Метод анализа: Микроскопия

Соответственно международным стандартам у каждого пациента необходимо смотреть два препарата, окрашивая их по методу Грама и Лейшману-Гимза.

Методика окраски по Лейшману-Гимза является основной методикой для определения инфекции Trichomonas и внутриклеточных микроорганизмов, также эта методика очень информативна для исследования клеточных элементов; позволяет оценить отличия эпителия генитального тракта (вагинальный, эндоцервикальный, слизистая оболочка уретры).

На основе методики окраски по Граму микробы подразделяются на Грам-положительные и Грам-отрицательные. В диагностике бактериального вагиноза это основной метод окраски, поскольку он позволяет определить критерии Nugent.

Интерпретация результата:

ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ

• Суперфициальные. Максимального своего числа (96%) достигают во время овуляции. К 27-28 дню цикла их число падает до 4%.  
• Интермедиарные. Составляют большую часть клеток в первые (74-76%) и последние (96%) дни цикла. Минимальное их количество во время овуляции (3,5%).
• Парабазальные. У женщин репродуктивного возраста имеются в препарате только во время менструации. Также их часто можно обнаружить при низком уровне эстрогенов.
• Базальные. В препарате здоровых женщин не определяются. Обнаружение базальных клеток указывает на наличие воспалительного процесса слизистой или травматического повреждения. При воспалении также имеется множество лейкоцитов. NB! Парабазальные и базальные клетки также являются отличительным признаком атрофического вагинита.
• Спонтанно отслоившиеся клетки эндометрия. У женщин репродуктивного возраста их можно обнаружить первые 12 дней после менструации. Обнаружение клеток эндометрия во второй фазе цикла свидетельствует о наличии эндометрита, полипа эндометрия или связано с использованием внутриматочного контрацептивного средства.

ЛЕЙКОЦИТЫ

• Нейтрофилы. Клетки острой фазы. В препарате можно обнаружить следующие патологические формы:
  • гиперсегментированные: число ядерных сегментов 6 и более, величина клеток может превышать 15 μm. Возникают при мегалобластной и пернициозной анемии, хронической инфекции и применении химиотерапии. 
  • гипосегментированные: число ядерных сегментов 3 и меньше. Возникают при некоторых инфекциях и на фоне применения химиотерапии (особенно препаратов группы сульфонамидов).
• Моноциты или мононуклеарные фагоциты. Отвечают за хроническую фазу воспаления.
• Эритроциты. У некоторых женщин определяются в период овуляции и перед мен- струацией.

СООТНОШЕНИЕ ПОЛИМОРФОНУКЛЕАРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ ПМН И ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

• У здоровых женщин это соотношение менее, чем 1:1.
• Пропорции клеток 2:1 и 3:1 и более, являются маркером острого воспаления.  

МИКРООРГАНИЗМЫ

Нормальная микробиота у мужчин

Нормальная микробиота у женщин

ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ ПАЛОЧКИ

• Genus Lactobacillus. Их количество в препарате колеблется циклично, больше всего их можно обнаружить на фоне овуляции (10-14 день). Иногда множество лактобацилл имеется на 19-23 день цикла, что может вызвать цитолиз промежуточных клеток.
• Genus Corynebacterium. Большинство представителей этого вида факультативные или же непатогенные.

ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОККИ 

• Genus Staphylococcus
  • S. aureus в сообществе с E. coli, и стрептококками группы В и Trichomonas vaginalis может вызывать аэробный вагинит. На наличие аэробного вагинита указывает большое количество парабазальных клеток и лейкоцитов (также их гранулярный аспект).
  • S. epidermidis является важнейшим фактором уретрита и простатита у молодых (42%).
  • Увеличилась частота возникновения бактериурии с S. saprophyticus у молодых женщин. Также при инфекции амниона у беременных женщин может быть изо- лирован из материала цервикального канала.
• Genus Streptococcus
  • S. agalactiae (стрептококк В группы) колонизируется на слизистой оболочке половых путей 5-40% женщин. Вульвовагинит же может возникнуть только тогда, когда их число достигнет не менее 108 PMÜ/g, а также будет определяться одновре- менно E. coli и S. aureus. Часто может быть одновременно с Candida albicans (55%).

ACTINOMYCES

Имеется в полости рта здоровых людей и на слизистой оболочке половых путей женщин. В качестве колонизирующего микроорганизма может быть у женщин, использующих внутриматочные противозачаточные средства (7%). Достаточно часто Actinomyces сопровождается Entamoeba gingivalis. Может быть причиной симптоматической инфекции.

ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ ПАЛОЧКИ

• Представители Enterobacteriaceae
  • Наиболее частые возбудители инфекций уротракта это Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., Pseudomonas spp.
  • Диагностическую ценность имеет обнаружение E. coli в больших количествах, особенно вместе с другими энтеробактериями и на фоне PMN либо же с BV- микробами.

ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ КОККИ 

• N. gonorrhoeae (гонококки)
• N. meningitidis (менингококки)
• Другие представители Neisseria с относительно низкой патогенностью изолируются из дыхательных путей. N. lactamica часто изолируется из урогенитального тракта.
• Genus Acinetobacter. В большинстве своем кокобациллы или диплококки. Изоли- руются из слюны, мокроты, мочи и влагалищного секрета.  
• Genus Moraxella. Морфологически неотличимы от нейсерий. В некоторых случаях можно обнаружить M. catarrhalis среди полиморфных лейкоцитов.

GARDNERELLA VAGINALIS

Имеется в микрофлоре у 45-58% здоровых женщин репродуктивного возраста и у 27% женщин в период менопаузы.

LEPTOTRICHIA

Относительно низкой патогенности. Возникает обычно на фоне трихомоноза, бактериального вагиноза или длительного курса противовоспалительного лечения.

ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ NUGENT

• Различное число морфотипов в препарате, окрашенном по Граму
• Норма 0-3
• Пограничное значение 4-6
• Бактериальный вагиноз >7

ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ AMSEL

• Гомогенные молокообразные выделения из влагалища
• Положительный аминовый тест
• Ph >4,5
• Микроскопическая находка: клетки „clue“ (~20%) Gardnerella, Mobiluncus и др.

ГРИБЫ

• Бластоспоры, лейкоцитов мало или отсутствуют – колонизация
• Бластоспоры, лейкоцитов много – Candida non-albicans, необразующая псевдомицелий
• Бластоспоры, лейкоцитов много – инфекция Candida albicans